載玻片
載玻片厚度應(yīng)在0．8～L 2mm之間，太厚的玻片，一方面光吸收多，另一方面不能使激發(fā)光在標(biāo)本上聚焦。載玻片必須光潔，厚度均勻，無明顯自發(fā)熒光。有時(shí)需用石英載玻片。
蓋玻片
蓋玻片厚度在o．17mm左右，光潔。為了加強(qiáng)激發(fā)光，也可用干涉蓋玻片，這是一種特制的表面鍍有若干層對(duì)不同波長(zhǎng)的光起不同干涉作用的物質(zhì)（如氟化鎂）的蓋玻片，它可以使熒光順利通過，而反射激發(fā)光，這種反射的激發(fā)光又可激發(fā)標(biāo)本。
標(biāo)本
組織切片或其他標(biāo)本不能太厚，如太厚激發(fā)光大部消耗在標(biāo)本下部，而物鏡直接觀察到的上部不能充分激發(fā)。另外，細(xì)胞重疊或雜質(zhì)掩蓋、背景非特異染色引起的熒光影響判斷。
鏡油
一般暗視野熒光顯微鏡和油鏡觀察標(biāo)本時(shí)，必須使用鏡油，使用特制的無熒光鏡油，也可用甘油代替，液體石蠟也可用，只是折光率較低，對(duì)圖像質(zhì)量略有影響
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