避免PCR產(chǎn)物反復(fù)凍融，有效的方法是?按單次使用量分裝保存?。將PCR產(chǎn)物分裝到低吸附離心管中，每管預(yù)留10%體積，標(biāo)記好日期和濃度，采用“先存先用"原則。這樣每次只需取用所需量，避免反復(fù)凍融整個(gè)樣本。

?其他關(guān)鍵措施包括：?

?添加保護(hù)劑?：在PCR產(chǎn)物中加入5%-10%甘油或0.1mM EDTA，能緩沖凍融過程中的物理損傷并抑制核酸酶活性。

?優(yōu)化保存溫度?：短期存放（1-2天內(nèi)）可置于4℃；長(zhǎng)期保存（數(shù)月）應(yīng)置于-80℃。若需頻繁使用，可短期存放于4℃（不超過72小時(shí)）。

?嚴(yán)格質(zhì)量控制?：每次凍融后建議通過電泳檢測(cè)完整性，若出現(xiàn)條帶彌散或OD260/280比值異常（>1.9），需重新擴(kuò)增樣本。