人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞(通常指 WERI-Rb-1 細胞系)是研究視網(wǎng)膜母細胞瘤(Retinoblastoma, RB)的核心體外模型,具有明確的分子特征和穩(wěn)定的生物學。
一、遺傳與分子特征
?RB1基因狀態(tài)?:攜帶RB1基因雙等位缺失,導致pRb蛋白功能喪失,是研究RB1通路失活的理想模型
?細胞周期異常?:因pRb缺失,G1/S檢查點失控,細胞持續(xù)進入S期,促進腫瘤發(fā)生
?基因組穩(wěn)定性?:長期傳代可能產(chǎn)生遺傳漂變,建議早期凍存主細胞庫以保持遺傳一致性
二、細胞功能特性
?抗失巢凋亡能力?
作為懸浮細胞系,WERI-Rb-1具備抵抗失巢凋亡(anoikis resistance)的特性,模擬腫瘤細胞脫離原發(fā)灶后仍能存活的能力,適用于轉(zhuǎn)移機制研究。
?高增殖活性?
在適宜條件下,細胞倍增時間約為24–36小時,適合進行高通量藥物篩選或周期動力學分析。
?可轉(zhuǎn)染性?
可通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染、電穿孔或病毒載體實現(xiàn)外源基因?qū)耄m用于:
基因過表達或沉默(如shRNA、CRISPR/Cas9)
報告基因構(gòu)建(如熒光素酶、GFP標記)
三、免疫學與治療相關(guān)特性
?免疫原性較低?:作為腫瘤細胞,具有一定免疫逃逸能力,但可通過DC-CIK聯(lián)合療法增強機體識別與殺傷效果
四、培養(yǎng)與操作特性
?培養(yǎng)基需求?:推薦使用RPMI-1640 + 10% FBS + 1%雙抗,在37℃、5% CO?條件下培養(yǎng)
?傳代比例?:建議1:2至1:4,維持細胞密度在1×10?–1×10? cells/mL
?凍存穩(wěn)定性?:使用含DMSO的凍存液可長期保存,復蘇后活性通??蛇_80%以上